Развернутое молекулярно-генетическое исследование онкогенных мутаций в цитологическом материале узлов щитовидной железы

Развернутое молекулярно-генетическое исследование онкогенных мутаций в цитологическом материале узлов щитовидной железы BRAF- V600E; KRAS- кодон 12; KRAS- кодон 13; KRAS- кодон 61; NRAS- кодон 12; NRAS- кодон 13; NRAS- кодон 61; HRAS- кодон 12; HRAS- кодон 13; HRAS- кодон 61; RET/PTC1; RET/PTC3; PAX8/PPARγ, BRAF, TERT

Молекулярно-генетический анализ узла щитовидной железы

Описание исследования

Молекулярно-генетический анализ узлов щитовидной железы — это диагностический метод, который помогает оценить их риск малигнизации, то есть риск развития рака щитовидной железы. В настоящее время описано множество генов и белков, трансформация которых повышает риск развития опухоли.

В первую очередь речь идет о мутациях в сигнальных путях протеинкиназ, которые обеспечивают размножение и дифференцировку тироцитов. Так, в физиологических условиях сигнальный путь MAРK (митоген активирующая протеин киназа) связывает внеклеточные сигналы от факторов клеточного роста и прочих активных веществ и гормонов с ядром клеток. В результате происходит активация генов, ответственных за размножение клеток, дифференцировку и их запрограммированную гибель. В опухолях вследствие мутаций в белках KRAS, NRAS и BRAF может происходить аномальная пролиферация клеток, что ведет к активному росту опухоли и появлению ее возможности метастазирования.

Мутация белка BRAF может встречаться в различных опухолях: меланоме, немелкоклеточном раке легкого, колоректальном раке, карциномах щитовидной железы.

Наиболее хорошо известна мутация белка BRAF V600, когда происходит замена аминокислоты валин в положении 600 на глутамин.

Мутация гена BRAF V600E специфична для папиллярного рака щитовидной железы с частотой встречаемости 40% — 70%. По данным литературы, мутации BRAF V600E при папиллярном раке щитовидной железы коррелирует с более агрессивными ее формами. В ряде исследований, BRAF V600E имела прогностическое значение, повышая вероятность рецидива папиллярного рака щитовидной железы. При низкодифференцированной и анапластической карциноме щитовидной железы данная мутация определяется в 25% — 48% случаев.

Определение мутации BRAF V600 в клеточном материале, полученном при пункционной биопсии узлов щитовидной железы может быть полезным, а в ряде случаев необходимым для определения дальнейшей лечебной тактики.

Это исследование предоставляет возможность, прежде всего, уточнить предоперационный диагноз в спорных случаях и принять решение о необходимости и срочности хирургического вмешательства, уточнить объем оперативного вмешательства.

Немного теории

Рак щитовидной железы - онкологическое заболевание, характеризующееся образованием узлов в щитовидной железе с различным потенциалом злокачественности. Рак щитовидной железы встречается довольно часто, однако в большинстве случаев является неагрессивным.

Самый распространенный вид рака щитовидной железы - папиллярная карцинома. Это дифференцированная форма рака, развивающаяся из фолликулярных клеток щитовидной железы и встречается до 75% случаев. Он медленно растет и не склонен к метастазированию особенно при малых размерах узла. Среди папиллярных карцином выделяют различные подтипы, различающиеся по своему потенциалу злокачественности и особенностям поведения. В гистологическом заключении операционного материала можно увидеть следующие варианты:

фолликулярный, онкоцитарный (В клеточный), солидный/трабекулярный вариант, диффузный склерозирующий вариант, макрофолликуллярный, высококлеточный (Tall cell), Warthin - like вариант и несколько других более редких вариантов.

Папиллярная карцинома растет очень медленно, в среднем 1 мм в год. При достижении размеров более 1 см в диаметре может метастазировать в лимфатические узлы шейной группы: центральную шейную и боковую шейную клетчатку. В большинстве случаев случаи папиллярной карциномы могут быть прооперированы радикально.

В настоящее время одной из актуальных тем обсуждения в медицинском сообществе является наблюдение индолентных форм папиллярного рака щитовидной железы, то есть узлов небольших размеров, которые не растут, но по результатам ТАБ являются карциномой.

Довольно редко, но встречаются агрессивные формы папиллярной карциномы, характеризующиеся ранним и обширным метастазированием. Встречаются низкодифференцированные формы папиллярной карциномы, характеризующиеся низкой чувствительностью к терапии радиоактивным йодом, то есть не захватывающие йод.

Фолликулярный рак щитовидной железы развивается из фолликулярных клеток и встречается примерно в 2-5% случаев всех узлов щитовидной железы. Также как и папиллярный относится к высоко дифференцированному типу карцином щитовидной железы. При цитологическом заключении “фолликулярная опухоль” фолликулярный рак выявляется в 15-20% случаев.

Подтипом фолликулярного рака щитовидной железы является гюртле-клеточная карцинома.
Фолликулярный рак щитовидной железы, как правило, не распространяется на лимфатические узлы, но может в некоторых случаях затрагивать другие части тела, например, легкие и кости.
Лечение фолликулярного рака щитовидной железы аналогично лечению рака папиллярного. Гюртле-клеточная карцинома (также называемая онкоцитарной или оксифильной) в отличие от других дифференцированных раковых заболеваний щитовидной железы обладает меньшей способностью концентрировать радиоактивный йод, который часто используется при лечении дифференцированного рака щитовидной железы.

Медуллярная карцинома щитовидной железы развивается из С клеток щитовидной железы и относится к агрессивным формам рака щитовидной железы.
Анапластическая карцинома является наименее распространенным, однако самым агрессивным типом рака щитовидной железы.  На долю заболевания приходится всего лишь 1-2% всех случаев. Ранее считалось, что она характерна для очень пожилых людей, однако в последнее время участились случаи выявления анапластической карциномы у людей среднего возраста. В лечении этой опухоли применяют химиотерапию, оперативное лечение и лучевую терапию. При своевременном выявлении опухоли и скором начале лечения заболевание может иметь благоприятный прогноз.

В ряде случаев в щитовидной железе может быть выявлена лимфома. Это лимфопролиферативное заболевание, которое в настоящее время хорошо поддается терапевтическому лечению не требует оперативного вмешательства.

Ключевой способ определения злокачественного процесса – тонкоигольная аспирационная биопсия и последующее цитологическое исследование полученного материала. А молекулярно-генетический анализ узла щитовидной железы позволяет определить наличие мутаций, типичных для рака, что важно для последующего подбора схемы терапии и ведения пациента после операции.

Подготовка к анализу

Необходимость и особенности подготовки определяются лечащим врачом.

Показания к молекулярно-генетическому исследованию узла щитовидной железы

Определение мутации BRAF V600E при выполнении пункционной биопсии может быть рекомендовано для достижения следующих целей:

• Дифференциальная диагностика опухолей щитовидной железы неизвестного потенциала злокачественности.

• Уточнение цитологического диагноза при наличии неопределенного заключения “фолликулярная опухоль” и клеточная атипия (Bethesda IV и III, соотв.);

• Повышение информативности цитологического заключения при наличии ассиметрично увеличенных лимфоузлов на стороне опухоли.

• Подтверждение или исключение метастазирования в щитовидную железу другой карциномы;

• Подозрение или исключение лимфомы в щитовидной железе.

• Возможно послеоперационное определение мутации BRAF V600E в гистологических блоках или в нативном материале опухоли и/или ее метастазов. Такое исследование может быть рекомендовано и полезно для:

• Определения группы клинического риска рецидива дифференцированного рака щитовидной железы.  

• Прогноза развития радиойодрезистентности оценки ответа на лечение после проведения терапии радиойодом и получении неоднозначного ответа на лечение.

• Понимания степени агрессивности опухоли при прогрессировании опухолевого процесса. В этих случаях рекомендуют пунктирование всех очагов поражения с описанием экспрессии мутации гена в каждом из них.

Молекулярно-генетический анализ узла щитовидной железы также проводится с целью определения показаний к назначению комплексной таргетной терапии с применением препаратов ингибиторов тирозинкиназ. При цитологическом заключении “анапластическая карцинома” определение мутации BRAF V 600 жизненно необходимо.

Интерпретация результатов диагностики

В норме в результатах исследования должно быть указано «мутация не выявлены». Однако, отсутствие мутации BRAF не указывает на то, что рака нет с абсолютной точностью. Ген BRAF очень гетерогенен и в своем составе имеет множество белков, где также возможны мутации, способствующие развитию рака щитовидной железы. Также возможны мутации в генах других протеинкиназ. Если результат диагностики положительный и в заключении указывается конкретная мутация, то это позволяет судить о наличии рака щитовидной железы, причем довольно агрессивной его формы.

Если вы решили пройти молекулярно-генетическое исследование узлов щитовидной железы, то постарайтесь с результатами обследования обратиться к врачу. Врач поможет вам сориентироваться в дальнейшей тактике лечения и наблюдения.

Если необходимо сделать молекулярно-генетическое исследование узлового образования щитовидки, обратитесь в Северо-Западный центр эндокринологии. Филиалы клиники расположены в Санкт-Петербурге и Ленинградской области. А уточнить стоимость услуги и другие интересующие вопросы можно по номеру +7 (812) 565-11-12 или оставив заявку на обратную связь через соответствующую форму на сайте. 

Читайте также:
Биоимпедансный анализ тела,
Расшифровка анализа на кальцитонин в крови